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1综述 1

1.1沙漠特种油料作物——好好芭 1

1.1.1好好芭简介 1

1.1.2好好芭的引种与驯化栽培 2

1.1.3好好芭基因资源的利用 6

1.2植物抗逆生物学机理 8

1.2.1植物抗逆的形态及生理基础 9

1.2.2植物抗逆相关蛋白及其基因 10

1.3植物抗逆基因分子水平上的研究方法 17

1.3.1消减杂交 17

1.3.2 DDRT-PCR 18

1.3.3抑制性消减杂交 20

1.3.4 cDNA微阵列和基因芯片 23

1.4植物抗逆基因蛋白质水平上的研究方法 24

1.4.1蛋白质组学研究的主要方法 24

1.5本研究的目的与意义 29

2干旱和低温胁迫下好好芭叶片的蛋白质组学研究 30

2.1材料及方法 30

2.1.1材料 30

2.1.2双向电泳蛋白样品的制备 30

2.1.3等点聚焦电泳 31

2.1.4 SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳 32

2.1.5胶内酶解和质谱分析 32

2.2结果与分析 33

2.2.1干旱和低温胁迫下好好芭叶片蛋白质组分析 33

2.2.2胶图对比分析结果 35

2.2.3胶图数据分析 37

2.2.4质谱分析结果 43

2.3讨论 50

3低温胁迫下好好芭叶片抑制消减杂交cDNA文库的构建与分析 57

3.1材料与方法 57

3.1.1材料 57

3.1.2好好芭RNA的制备与检测 57

3.1.3合成cDNA 59

3.1.4抑制性消减杂交（抑制消减杂交cDNA文库） 63

3.2结果与分析 70

3.3讨论 73

4好好芭抗逆相关基因克隆与功能分析 76

4.1材料及方法 76

4.1.1材料 76

4.1.2 ScCu／ZnSOD和ScMnSOD基因EST的验证 78

4.1.3 ScCu／ZnSOD和ScMnSOD基因的克隆 83

4.1.4 SOD活性检测 85

4.1.5半定量RT-PCR 88

4.1.6土壤含水量的测定 90

4.1.7叶片相对含水量的测定 90

4.1.8叶片相对电解质渗漏的测定 90

4.1.9气孔观察 91

4.2结果与分析 91

4.2.1好好芭干旱特异表达基因的克隆 91

4.2.2克隆的抗旱基因功能分析 95

4.3讨论 119

4.3.1 SOD基因与好好芭抗逆 119

4.3.2水通道蛋白基因与好好芭抗逆 119

4.3.3转基因植株表型差异与基因沉默 120

4.3.4半定量RT-PCR内参的选择 121

5好好芭抗逆机制分析 122

参考文献 126

附录 141

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